10 现在的位置:首页 > 期刊导读 > 2018 > 10 >

干扰素调节因

【作者】 武乃倩 田秀芳

【关键词】 干扰素调节因子4 信号转导 Th1

摘要】目的 研究干扰素调节因子4(IRF-4)在Toll样受体3(TLR-3)介导的小鼠流产过程中的作用机制.方法 选取SPF级近交系Balb/C雌鼠、C57 BL/6雄鼠,将孕鼠随机分为TLR-3抗体阻断组、CXCL12抗体阻断组、血清对照组,于孕4.5、5.5、6.5d连续腹腔注射TLR-3抗体/CXCL12抗体/血清,孕6.5、7.5d连续腹腔注射多聚次黄苷酸胞苷酸Poly(I:C)或PBS.孕9.5、13.5、17.5 d时处死小鼠,计算胚胎吸收率,收集外周血、脾脏、子宫胎盘组织.利用小鼠淋巴细胞分离液分离外周血、脾脏、子宫胎盘来源的小鼠淋巴细胞,实时PCR法检测外周血、子宫胎盘来源的小鼠淋巴细胞中IRF-4 mRNA转录水平,流式细胞法检测外周血、脾脏来源的小鼠淋巴细胞中Th17细胞比例及子宫胎盘淋巴细胞中CXCR4阳性细胞比例,免疫组化法检测子宫胎盘组织中IRF-4蛋白表达水平.结果 在外周血淋巴细胞中,Poly(I:C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平在孕9.5、13.5、17.5d时显著高于对照组(P<0.05),且孕13.5d时两组转录水平差异达到最高;给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,Poly(I:C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平与对照组相比无明显差异(P=0.867、0.931、0.953).在子宫胎盘来源的淋巴细胞中,IRF-4 mRNA转录水平的变化趋势与PBMCs类似,Poly(I:C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平在孕9.5、13.5d时显著高于对照组(P<0.01),在孕17.5 d时无显著差异(P=0.504);给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,Poly(I:C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平与对照组相比无明显差异(P=0.081、0.219、0.178).流式细胞法检测Th17细胞(CD4阳性、IL-17A阳性)比例.在PBMCs中,三个孕期时间点时,Poly(I:C)诱导流产组的CD4阳性、IL-17A阳性比例显著高于对照组(P<0.05);TLR-3抗体预先阻断后,CD4阳性IL-17A阳性比例在两组中无明显差异(P=0.612、0.320、0.167).在脾脏淋巴细胞中,Poly(I:C)诱导流产组的CD4阳性IL-17A阳性比例在孕9.5、13.5、17.5 d时显著高于对照组(P<0.05),TLR-3抗体预先阻断后,差异无统计学意义(P=0.109、0.413、0.631).流式细胞法检测UMGCs中的CX-CR4阳性细胞比例.CXCR4阳性细胞比例在IRF-4阳性细胞中显著高于IRF-4阴性细胞(P<0.01),Poly(I:C)注射可显著提高IRF-4阳性及IRF-4阴性细胞中CXCR4的表达;预先给予CXCL12(CXCR4配体)抗体阻断,无论是在IRF-4阳性或IRF-4阴性细胞中,Poly(I:C)诱导组与对照组中CXCR4的表达无明显差异(P=0.122).免疫组化法检测子宫胎盘组织中IRF-4蛋白表达水平,Poly(I:C)诱导流产组的IRF-4免疫组化光密度值在孕9.5、13.5d时显著高于对照组(P<0.05),孕17.5 d时无明显差异(P=0.403);给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,两组之间的表达差异无统计学意义(P=0.664、0.205、0.486).结论 IRF-4在此流产过程中与对照组相比表达有差异,包括mRNA转录水平、蛋白水平均有显著差异.TLR-3抗体预先阻断小鼠体内TLR-3后,IRF-4转录及蛋白表达水平差异消失.

上一篇: HMGB1/TLR4在
下一篇: 去势抑郁模型

版权所有 中华预防医学会    京ICP备13001313号
地址:北京市朝阳区劲松东口华泰饭店 8层    邮编:100021